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Bioenno Lifesciences 003760 產(chǎn)品說明書

更新時間:2018-04-12      點(diǎn)擊次數(shù):4478

貨號:003760

品名:sliceGolgi Kit sliceGolgi試劑盒

 

   

 

產(chǎn)品特點(diǎn):

 

自由浮動切片/切片上進(jìn)行高爾基染色 

Bioenno  也在銷售sliceGolgi  試劑盒,并增加  了  固色劑 套裝。該  sliceGolgi 套件的設(shè)計上運(yùn)行的片/段高爾基染色。浸漬和染色可以在自由浮動部分(50?400微米厚度)上進(jìn)行。額外的   固色劑套裝使用Bioenno的醛來處理額外的樣品。  

該試劑盒已經(jīng)在來自大鼠和小鼠的許多類型的腦切片中進(jìn)行了廣泛的測試,它們是:

 新鮮切片,例如使用組織切碎機(jī)快速制備的急性切片。

 器官切片培養(yǎng)物,  例如培養(yǎng)的海馬切片和培養(yǎng)的皮層切片。

 已經(jīng)完成電生理記錄和/或藥物施用的人造腦脊液(ACSF) - 切片。

 用Bioenno醛  固定劑(產(chǎn)品目錄號:003780)通過灌注或浸泡固定大腦的切片。固定的大腦可以在室溫(RT,15至25攝氏度)下在50?400微米處系統(tǒng)切片,并且切片可以單獨(dú)進(jìn)行高爾基染色,單獨(dú)的免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)或組合的高爾基染色和ICC 。

 額外的固色劑 套件允許處理更多的樣品。Bioenno建議購買固定試劑盒的sliceGolgi試劑盒。

 

所述  sliceGolgi套件 可以被施加到視網(wǎng)膜,脊髓,和培養(yǎng)的細(xì)胞以染色神經(jīng)元過程。

 

所述sliceGolgi套件產(chǎn)生樹突和棘(參見圖)的兩個可靠和高質(zhì)量的標(biāo)記。神經(jīng)元浸漬在50至200微米厚的切片中  超快,僅在某些情況下2-3天。一般來說,浸漬時間取決于部件的年齡和厚度,需要4-7天。該試劑盒可儲存在15-25ºC的黑暗環(huán)境中長達(dá)12個月。

 

 

高爾基染色和免疫組化/免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)  

Bioenno Tech已經(jīng)成功地將sliceGolgi試劑盒與ICC一起用于同一腦部分(見圖4-9)。為了執(zhí)行組合的高爾基染色和ICC,固定切片首先經(jīng)歷高爾基染色,然后進(jìn)行ICC:

(1)組織處理:將  動物心臟灌注生理鹽水,然后灌注由Bioenno Tech開發(fā)的  固定劑 (目錄號:003780)。將大腦從顱骨上解剖并固定1-3天(4℃)。然后使用vibratome或類似類型的切片機(jī)/顯微鏡在RT下將腦部切成50?100微米厚。切片以0.1M PB(pH 7.4)收集并可以在緩沖液中儲存長達(dá)一周(4℃)。

固定切片可用于單獨(dú)的高爾基染色,單獨(dú)的ICC,以及組合的高爾基染色和ICC。

(2)  高爾基染色:  在RT(15-25℃)使用sliceGolgi試劑盒 對自由浮動切片進(jìn)行高爾基染色  。神經(jīng)元的浸潤可能需要2-5天。

(3)  ICC:  自由浮動部分可以采用標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物(ABC)方法。通過在含有H 2 O 2的3,3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)中孵育切片可以使免疫反應(yīng)產(chǎn)物可視化。

注:  該  sliceGolgi套件 不適用于冷凍組織工作。切割前固定的組織塊不能冷凍。

 

 

產(chǎn)品功能

  • 適用于切片/切片組織(厚度為50至400微米)
  • 對自由浮動部分進(jìn)行浸漬和染色
  • 新型醛  固定劑 和增強(qiáng)浸漬液
  • 神經(jīng)元的浸潤很快(2-7天)
  • 結(jié)合高爾基體染色和免疫組織化學(xué)
  • 經(jīng)過驗(yàn)證的結(jié)果/用戶友好
  • 足夠多達(dá)  1000個腦區(qū) (50-400微米厚,尺寸約1×1.5厘米)
  • 用于體外實(shí)驗(yàn)室使用
  • 專門的
  • 12個月保修

 

 

使用sliceGolgi試劑盒證明的結(jié)果 (產(chǎn)品目錄號:003760)

  • 經(jīng)過驗(yàn)證的結(jié)果使用sliceGolgi套件 

樹枝狀分支和刺已經(jīng)可靠地浸漬并用切片凝膠試劑盒染色。 

 

 

圖1 - 額皮質(zhì)層II中浸漬并染色的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬和染色神經(jīng)元中一日齡12(P12)C57BL小鼠的額皮質(zhì)。200微米厚的切片中的神經(jīng)元的樹突棘(箭頭)標(biāo)記良好。箭頭表示絲狀偽足突起,未成熟的刺。圖像是使用20x物鏡拍攝的。

 

 

圖2 - 新皮層第三層錐體神經(jīng)元的樹枝狀分支

使用sliceGolgi試劑盒 浸漬和染色位于20×物鏡的額頂皮質(zhì)運(yùn)動區(qū)域的錐體神經(jīng)元的斜樹突和主枝(莖)。C57BL小鼠12天齡。

 

 

圖3 - 下丘腦外側(cè)的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬自由浮動的條件下在100微米厚的切片的神經(jīng)元。從P12 C57BL小鼠的外側(cè)下丘腦區(qū)域采集具有軸突終端的染色的神經(jīng)元(20x物鏡)。在樹枝狀分支上發(fā)現(xiàn)許多絲狀偽足樣突起(箭頭)。

 

 

圖4 - 聯(lián)合使用sliceGolgi試劑盒和免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)

高爾基染色和ICC的組合允許同時觀察樹突棘和免疫反應(yīng)產(chǎn)物。通常,自由浮動部分首先被處理用于高爾基染色,然后用于ICC。對于高爾基染色,通過升主動脈用0.9%鹽水溶液灌注動物,然后用新制備的固定劑(目錄號:003780,Bioenno Tech)灌注。將腦從顱骨上解剖并固定1-3天(4℃)。然后使用vibratome以50-100μm厚度切割腦,并將切片收集到0.1M PB(pH 7.4)中的組織培養(yǎng)孔中。該sliceGolgi套件(目錄號:003760)浸漬(2-5天,RT)并染色樹突(黑色)。為了執(zhí)行ICC,將自由浮動切片進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物(ABC)方法。通過將切片在含有0.01%H 2 O 2的 0.04%3,3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)中溫育8-10分鐘來使免疫反應(yīng)產(chǎn)物可視化。使用4x物鏡從2個月大的C57小鼠的海馬中取得圖像。

 

 

圖5 - 在同一腦切片上進(jìn)行的高爾基染色和ICC

結(jié)合的高爾基染色和ICC:1)C57小鼠心臟灌注生理鹽水,然后用Bioenno開發(fā)的醛固定劑 (目錄號:003780)。2)使用sliceGolgi試劑盒對自由浮動切片(50微米)進(jìn)行高爾基染色。浸漬時間僅在22±1℃時為2天。3)使用標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物方法處理小白蛋白(PV)的ICC。單克隆小鼠抗PV抗體(1:20,000,MAB1572,Chemicon)的溫育時間在22±1℃過夜。使用4x物鏡從丘腦攝取圖像。

 

 

圖6。- 樹枝狀分支和PV-免疫陽性神經(jīng)元

高爾基染色和ICC在相同的腦部分進(jìn)行。使用sliceGolgi試劑盒在自由浮動部分(100μm)上進(jìn)行高爾基染色。浸漬時間為22±1℃3天。從4個月大的C57小鼠的下臂拍攝圖像(63倍物鏡)。

 

 

圖7 - 高爾基染色的樹突和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色皮層神經(jīng)元的樹枝狀分支在皮層的層III。免疫反應(yīng)性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。從4個月大的C57小鼠拍攝圖像(63倍物鏡)。

 

 

圖8 - 高爾基染色的皮層神經(jīng)元和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色神經(jīng)元的樹枝狀分支在皮質(zhì)的更深的層。僅在22±1℃時,100μm厚切片中神經(jīng)元的浸潤需要2天。免疫反應(yīng)性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。該圖像是使用20x物鏡從2個月大的C57小鼠拍攝的。

 

 

圖9 - 在相同的腦切片上進(jìn)行高爾基染色和ICC

該sliceGolgi套件來標(biāo)記樹突分支。以20x物鏡顯示的頂部面板中的盒裝區(qū)域被放大(63x)以突出樹突棘(箭頭)和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元(箭頭)。這些圖像取自2月齡C57BL小鼠的額頂皮層(體感區(qū)域)。

 

 

 

產(chǎn)品信息:

 

貨號

品名

規(guī)格

價格

品牌

003780

Fixative Kit(use together with sliceGolgi Kit)

kit

1683

Bioenno

003760

sliceGolgi Kit

kit

6766

Bioenno

 006690

eliteGolgi Kit

kit

6766

Bioenno

003010

superGolgi Kit

kit

6766

Bioenno

 

 

 

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Bioenno Lifesciences 是Bioenno Tech,LLC的生物醫(yī)學(xué)子公司。自2011年以來,我們一直為神經(jīng)科學(xué)研究提供醫(yī)學(xué)界業(yè)界的醫(yī)療試劑盒,包括高爾基試劑盒,免疫組織化學(xué)基質(zhì)試劑盒以及染色溶液和組織學(xué)試劑盒。多年來,我們 一直在積極研究新技術(shù),這些新技術(shù)不斷轉(zhuǎn)變?yōu)楦咝阅墚a(chǎn)品和/或升級我們的在線產(chǎn)品。

 

 

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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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