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Favorgen FASOI 001-1說明書
Favorgen位于中國臺灣國家生物技術(shù)園區(qū)。它通過自動化系統(tǒng)建立了ISO合格工廠，
生產(chǎn)高質(zhì)量的分子生物學(xué)產(chǎn)品和臨床化學(xué)試劑。目前，F(xiàn)avorgen在美國，中國，韓國和丹麥設(shè)立分支機構(gòu)，并在30多個國家設(shè)立了分銷網(wǎng)絡(luò)。自成立以來，F(xiàn)avorgen已經(jīng)在其先進的生產(chǎn)設(shè)施上投入了大量資金，以競爭力的價格為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。Favorgen致力于通過與學(xué)術(shù)和行業(yè)合作伙伴的內(nèi)部和合作開展研究，以不斷提供高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。
核酸提取土壤DNA小試劑盒
FavorPrepTM Soil DNA Isolation Mini Kit
Favorgen FASOI 001-1說明書
Cat.No. : FASOI 000, 4 preps
FASOI 001, 50 Preps
FASOI 001-1, 100 Preps
(For Research Use Only)
FASOI 000
(4 preps_sample)
FASOI 001
(50 preps)
FASOI 001-1
(100 preps)
Glass Beads | 1 g | 12 g | 25 g |
SDE1 Buffer | 3.6 ml | 40 ml | 70 ml |
SDE2 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 25 ml |
SDE3 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 30 ml |
SDE4 Buffer | 1.5 ml | 25 ml | 40 ml |
Wash Buffer (concentrate) * | 1.5 ml | 20 ml | 40 ml |
Elution Buffer | 1.5 ml | 25ml | 50 ml |
SDE Mini Column | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Collection Tube | 8 pcs | 100 pcs | 200 pcs |
Elution Tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Bead tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
User Manual | 1 | 1 | 1 |
* Preparation of Wash Buffer for first use: | |||
Cat. No: | FASOI 000 | FASOI 001 | FASOI 001-1 |
ethanol volume for Wash Buffer | 6 ml | 80 ml | 160 ml |
規(guī)格:
原理：自旋柱(硅膠膜)樣品：0.25~0.5g
手術(shù)時間：<60分鐘排氣量：50~200毫升
重要說明：
本系統(tǒng)中提供的緩沖區(qū)包含刺激物。在處理這些緩沖器時，戴上手套和實驗室外套。
使用前檢查SDE 1緩沖液，如有沉淀，應(yīng)在60℃溫10分鐘。
使用前，在洗滌緩沖液中加入適量乙醇(96%-100%)。
準(zhǔn)備加熱塊或水浴至70°C。如果從革蘭氏陽性細(xì)菌中分離出DNA，則準(zhǔn)備加熱塊或水浴至95°C進行另一次培養(yǎng)。
所有的離心步驟都是在微型離心機中全速進行的(~18，000 x g)。
預(yù)熱洗脫緩沖液或ddH2O至60°C為洗脫步驟。
“一般性議定書”：
在開始以下步驟之前，請閱讀重要說明。
加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。將0.25~0.5g的土樣移入珠管，然后放置在冰上。
-如果樣品是液體的，在2.0毫升的珠管中加入200毫升的樣品。
在樣品中加入600升SDE 1緩沖器，以大速度旋轉(zhuǎn)5分鐘。將樣品在70℃下孵育10 min，在孵育過程中旋轉(zhuǎn)兩次。
-從革蘭陽性桿菌中分離DNA，在95℃下進一步孵育5分鐘。
簡單地旋轉(zhuǎn)管子，以去除從蓋子內(nèi)部滴下來。
冷卻樣品混合物，加入200升SDE2緩沖液。通過渦旋使混合均勻。將樣品在冰上孵育5分鐘。
全速離心(~18，000×g)5分鐘。
仔細(xì)地將澄清的上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心管(未提供)。測量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
加入1體積異丙醇和渦旋混合均勻，全速離心10 min，使DNA顆?；?。
-例如：如果澄清的溶解液體積為450升，則在澄清的裂解液中加入450升異丙醇。
小心丟棄上清液，在紙巾上倒置管1分鐘，去除殘留液體。
-不要打亂佩爾號
加入200升預(yù)加熱排放緩沖液或ddH2O，旋渦使DNA顆粒*溶解。
在樣品中加入100升SDE 3緩沖器，通過渦旋將其混合均勻。將樣品在室溫下孵育3分鐘。
-注：SDE 3緩沖器必須在每次使用前，通過大力vrotexing*暫停。
-切斷1毫升針尖的末端，使SDE 3緩沖器的插入更容易。
一
v 0515
全速離心2分鐘。
小心地將上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心機上(未提供)。測量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
(可選)如果需要無RNA的DNA，加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到樣品中，混合好。室溫培養(yǎng)2 min。
簡單地旋轉(zhuǎn)管子，以去除從蓋子內(nèi)部滴下來。
加入1份SDE 4緩沖液和1份乙醇(96%~100%)。通過脈沖旋渦充分混合.
例如：當(dāng)澄清液體積為250 l時，加入250升SDE 4緩沖液和250升乙醇(96%~100%)。
將SDE柱放入收集管中，并將所有樣品混合物轉(zhuǎn)移到SDE柱。全速離心1分鐘，然后丟棄流過，然后將sde柱放入ne中。 W收集管。
加入750升洗滌緩沖液(乙醇添加)到SDE柱。全速離心1分鐘，然后丟棄流道.
-確保在次使用時將乙醇(96%~100%)加入到洗滌緩沖液中。
重復(fù)第17步。
全速離心3分鐘，干燥SDE柱。
-重要的一步！這一步將避免殘留液體抑制后續(xù)的酶反應(yīng)。
將SDE柱放入1.5毫升的微離心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl預(yù)熱排液緩沖液或ddH2O。將SDE柱放置2分鐘 室溫。
-重要的一步！為了進行有效的洗脫，確保洗脫緩沖液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。
全速離心1 min以逃避DNA。
發(fā)現(xiàn)并修理故障，解決紛爭
問題 | 可能的原因 | 解答 |
基因組DNA的低產(chǎn)率或無產(chǎn)率 | ||
| 樣本存儲不當(dāng) | 糞便樣本存放在-20°C。 |
樣本中細(xì)胞數(shù)量少 | 增加樣本量 | |
不良細(xì)胞溶解 | ||
細(xì)胞溶解能力差，因為打珠不夠 time | 延長珠子打漿時間。 | |
DNA與柱膜結(jié)合不足 | ||
在dna結(jié)合之前，沒有在樣品中加入乙醇。 | 確保在DNA結(jié)合之前，在樣品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。 | |
乙醇和樣品裂解液在DNA結(jié)合之前沒有很好的混合。 | 確保乙醇和樣品裂解液在dna結(jié)合之前已*混合。 | |
W1/W2洗滌緩沖液制備不當(dāng) | ||
次使用時不加乙醇。 | 次使用時不加乙醇。 | |
在洗滌緩沖液中加入乙醇的體積或百分比是不正確的。 | 次使用時，一定要將適量的乙醇(96%-100%)加入到洗滌緩沖液中。 | |
DNA洗脫無效。 | ||
洗脫用水(DdH2O)的pH是酸性的。 | 確保ddH2O的pH值在7.0-8.5之間。 | |
使用洗脫緩沖液(提供)進行洗脫。. | ||
洗脫緩沖液或ddH2O不能被柱膜*吸收。 | 加入萃取緩沖液或ddH2O后，在離心前將SD柱放置5 min。 | |
基因組DNA質(zhì)量差 | ||
A 260/A 280
洗脫DNA率低 | 不良細(xì)胞溶解 | |
細(xì)胞溶解能力差，因為打珠時間不夠 | 延長珠子打漿時間。 | |
A 260/A 280
洗脫DNA率高 | 洗脫DNA中的大量殘留RNA | 在洗脫液中加入8升RNase A(50 mg/ml)，37℃孵育10 min。孵育后，加入200升SD2緩沖液和200升乙醇(96%~100%)，混合均勻。
-渦旋。然后從第7步開始遵循“一般協(xié)議”。 |
FASOI 000 | FavorPrep™土壤DNA分離迷你試劑盒 | 4個準(zhǔn)備。 | Glass Beads | 在室溫（15~25℃）下保存2年。 |
FASOI 001 | 50個準(zhǔn)備。 | |||
FASOI 001-1 | 100個準(zhǔn)備。 | |||
FASOI 002 | FavorPrep™土壤DNA分離Midi試劑盒 | 24個準(zhǔn)備。 | Glass Beads | 在室溫（15~25℃）下保存2年。 |
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