Haematologic Technologies制造高質(zhì)量，血漿來源的凝血蛋白，抗體，因子缺陷型血漿和血液收集管，用于體外研究使用。我們確保產(chǎn)品制造流程確保質(zhì)量控制嚴(yán)格，努力成為領(lǐng)頭凝血產(chǎn)品制造商。

上海起發(fā)現(xiàn)貨HTI凝血酶說明書

Thrombin (alpha)

凝血酶（alpha）

凝血酶原
的蛋白水解激活絲氨酸蛋白酶α-凝血酶是通過酶原，凝血酶原的蛋白水解激活而產(chǎn)生的。酶復(fù)合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個(gè)肽鍵的蛋白水解，從而產(chǎn)生一個(gè)NH2末端衍生的F1.2區(qū)和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“ A”鏈（Mr = 6000）組成，該鏈通過單個(gè)二硫鍵與“ B”鏈（Mr = 31,000）共價(jià)連接。

•  HCT-0020 人α-凝血酶

• 尺碼	100 µg，1 mg，10 mg（1 mg小瓶）
  公式	50％甘油/水（v / v）

  存儲(chǔ)	-20°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• HCT-DFP 人類α-凝血酶，DFP活動(dòng)站點(diǎn)被封鎖
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• 尺寸	100微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• HCT-FPRCK 人類α-凝血酶，PPACK（FPRck）有效部位被封鎖

• 尺寸	100微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• HCT-BFPRCK 人類α-凝血酶，生物素化的PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)被封鎖

• 尺寸	100微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• BCT-1020 牛α-凝血酶

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  尺碼	200微克，1毫克
  公式	50％甘油/水（v / v）

  存儲(chǔ)	-20°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• BCT-DFP 牛α-凝血酶，DFP活動(dòng)站點(diǎn)被阻止

• 尺寸	200微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• BCT-FPRCK 牛α-凝血酶，PPACK（FPRck）有效部位受阻

  尺寸	200微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• BCT-BFPRCK 牛α-凝血酶，生物素化的PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)被封鎖

  尺寸	200微克
  公式	20 mM Hepes，150 mM NaCl，pH 7.4

  存儲(chǔ)	-80°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

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• MCT-5020 鼠標(biāo)alpha-凝血酶

• 尺寸	50微克
  公式	50％甘油/水（v / v）

  存儲(chǔ)	-20°攝氏度
  純度	通過SDS-PAGE，> 95％

  活性測定	纖維蛋白原凝結(jié)或生色測定
  保質(zhì)期（正確存放）	12個(gè)月

α-凝血酶是通過酶原凝血酶原的蛋白水解激活而產(chǎn)生的高度特異性的絲氨酸蛋白酶（1）。在凝結(jié)過程中，凝血酶裂解纖維蛋白原形成纖維蛋白，導(dǎo)致凝結(jié)的終步驟，即形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負(fù)責(zé)前因子V和VIII因子的反饋激活。還已經(jīng)報(bào)道凝血酶激活因子XIII和血小板，并且還起血管收縮蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性通過兩種方式被阻止：1）被肝素輔因子II或抗凝血酶III /肝素復(fù)合物抑制?；?）與血栓調(diào)節(jié)蛋白形成復(fù)合物。凝血酶/血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物的形成導(dǎo)致凝血酶無法裂解纖維蛋白原并激活因子V和VIII，

凝血酶是由NH 2末端“ A”鏈（Mr = 6,000）和COOH末端“ B”鏈（Mr = 31,000）組成的兩條鏈酶，它們通過單個(gè)二硫鍵共價(jià)結(jié)合。人凝血酶比牛凝血酶短13個(gè)氨基酸，這是由于人蛋白上的凝血酶裂解位點(diǎn)不存在于牛蛋白中。

凝血酶還用于細(xì)菌中表達(dá)的融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割（9-11）。凝血酶敏感位點(diǎn)被摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白之間。通過用凝血酶裂解從表達(dá)的中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。

人，牛和小鼠的凝血酶是按照Nesheim等人的描述，使用Lundblad程序（1）的改進(jìn)方法，從純化的凝血酶原中制備的。（2）。凝血酶以50％（體積/體積）甘油/水的形式提供，應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過SDS-PAGE分析確定純度，并在凝血酶特異性凝血測定中測量活性，并與標(biāo)準(zhǔn)NIH凝血酶進(jìn)行比較。凝血酶也可通過DFP，F(xiàn)PRck或生物素化FPRck阻斷活性位點(diǎn)。

融合蛋白的裂解
除了其在凝血研究中的廣泛應(yīng)用，凝血酶還可用于融合蛋白的位點(diǎn)特異性裂解。凝血酶敏感位點(diǎn)被摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白之間。通過用凝血酶裂解從表達(dá)的釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。批次間的一致性確保每次都能獲得可重復(fù)的結(jié)果。對(duì)于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)與我們聯(lián)系以討論用于細(xì)胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。

1. Lundblad，RL等，Methods Enzymol。，45，156（1976）。
2. Nesheim，ME，等人，J.Biol.Chem。，1987。Chem.258，5386（1983）。
3. Fenton，JW等人，在《凝血酶的化學(xué)和生物學(xué)》（Editor and Biology of Thrombin）編輯。RL Lundblad，JW Fenton，KG曼恩，第43-70頁。密歇根州安阿伯市：安阿伯科學(xué)出版社，1977年。
4. Braughman，DJ，et al。，J.Biol.Chem。Chem。，242，5252（1967）。
5. Winzor，DJ等，Arch。生化。Biophys。，104，202（1964）。
6. Fenton，JW，et al。，J.Biol.Chem.Soc。，（1992），第3期。Chem。，252，3587（1977）。
7. Winzor，DJ等，J.Phys。Chem.68，338（1964）。
8. Magnusson，S。，在The Enzymes，編輯。PD博耶，卷。III，第277-321頁。紐約：學(xué)術(shù)出版社，1971年。
9. KL的Gaun和JE的Dixon的肛門。Biochem。，192，262（1991）。
10. Germino，J.和Bastia，D.，過程。Natl。學(xué)院 科學(xué) 美國，81，4692（1984）。
11. 張建元 生物化學(xué)雜志，151，217（1985）。