Avidity Avitag™ 技術(shù)

Avidity 開發(fā)和銷售用于連接分子的分子親和工具。我們的 AviTag™ 技術(shù)使用來(lái)自大腸桿菌的生物素連接酶 (BirA) 在*的 15 個(gè)氨基酸肽標(biāo)簽上采用高度靶向的酶促偶聯(lián)單一生物素。AviTag™ 序列是 GLNDIFEAQKIEWHE。面向鏈霉親和素包被的表面，這為分子結(jié)合相互作用創(chuàng)造了理想的展示。Avidity 的 AviTag 技術(shù)的科學(xué)優(yōu)勢(shì)已經(jīng)引起人們的注意。目前，AviTag 技術(shù)被制藥公司使用，并被 30 多個(gè)國(guó)家的研究人員使用。

BirA500 - BirA500：BirA 生物素-蛋白質(zhì)連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒，250.00 美元

BirA 生物素蛋白連接酶 (EC 6.3.4.15) 激活生物素以形成生物素 5'-腺苷酸，并將生物素轉(zhuǎn)移到生物素接受蛋白（如 AviTag™ 肽）。它還充當(dāng)生物素操縱子阻遏物。該蛋白質(zhì)由 birA 基因編碼。

請(qǐng)注意：我們強(qiáng)烈建議使用 AviTag™ 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反應(yīng)速率對(duì) AviTag™ 序列進(jìn)行生物素化，并且與使用的其他肽序列相比，反應(yīng)速率高出一個(gè)數(shù)量級(jí)或更多。與其他肽生物素化序列相比，AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育時(shí)間，從而最大限度地減少與蛋白酶和蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性相關(guān)的輔助問題。

產(chǎn)品信息

套件隨附以下物品：

• 兩 (2) 瓶 20uL，每瓶 1mg/mL BirA 生物素-蛋白質(zhì)連接酶（總共 40ug）
• 兩 (2) 個(gè)小瓶，每瓶 1.5mL BiomixA（0.5M 雙辛緩沖溶液，pH 8.3）
• 兩 (2) 個(gè)小瓶，每瓶 1.5mL BiomixB（100mM ATP、100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素）
• 兩 (2) 個(gè) 1.5mL 小瓶，每個(gè)額外的 BIO-200（500uM d-生物素）

BirA 生物素-蛋白質(zhì)連接酶 (EC 6.3.4.15) 通過(guò) ATP 中間體（生物素 5'-腺苷酸）以高效且有針對(duì)性的方式將 d-生物素與生物素受體肽/蛋白質(zhì)共價(jià)添加。酶促生物素化蛋白質(zhì)的下游應(yīng)用是多種多樣的、重要的和強(qiáng)大的。生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用經(jīng)常被用于親和層析或蛋白質(zhì)固定在表面或底物上。通過(guò)抗生物素抗體或親和素/鏈霉親和素-報(bào)告酶偶聯(lián)物（-HRP、-堿性磷酸酶）或熒光探針進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)成為可能。生物素化 MHC 分子的多聚體形式是免疫生物學(xué)中的常用工具。

當(dāng)與我們的 AviTag™ 生物素受體肽氨基酸序列結(jié)合使用時(shí)，生物素化發(fā)生的速度是天然大腸桿菌 BCCP 底物的兩倍，與其他肽序列的生物素化相比，其發(fā)生率高出一個(gè)數(shù)量級(jí)或更多。因此，與其他可用序列相比，AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育時(shí)間來(lái)完成生物素化。如果蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性或蛋白酶活性是一個(gè)問題，這可能對(duì)下游的成功很重要。

我們的 BirA 酶是大腸桿菌野生型，由 birA 基因編碼，并通過(guò)傳統(tǒng)方法純化至 99% 以上的純度。這種酶的其他名稱包括：生物素連接酶；生物素操縱子阻遏蛋白；比拉; 生物素全酶合成酶；生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶；生物素-[乙酰輔酶A-羧化酶]連接酶；生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；乙酰輔酶A全羧化酶合成酶；生物素：脫羧酶連接酶；生物素全酶合成酶；HCS。