PROGEN Biotechnik GmbH成立于1983年，是德國(guó)最早的生物技術(shù)公司之一，現(xiàn)已成為生命科學(xué)領(lǐng)域研究型抗體和免疫學(xué)檢測(cè)學(xué)試劑成熟生產(chǎn)商和供應(yīng)商。基于其免疫化學(xué)方面的核心競(jìng)爭(zhēng)力以及 ISO 13485認(rèn)證的通過(guò)，公司近年來(lái)擴(kuò)大了合作和業(yè)務(wù)，以蛋白質(zhì)檢測(cè)，定量和純化創(chuàng)新型的免疫學(xué)產(chǎn)品進(jìn)入了新的研究領(lǐng)域。特別是在應(yīng)用于基因治療研究的AAV滴度檢測(cè)質(zhì)量控制體系的研發(fā)上。

腺相關(guān)病毒（AAV）是非致病性的單鏈DNA病毒，作為基因治療的病毒載體，受到了廣泛的研究。該病毒可感染多種分裂和非分裂細(xì)胞，基因穩(wěn)定表達(dá)，低免疫源性。 AAV在多種疾病的多項(xiàng)臨床試驗(yàn)中，沒(méi)有顯示出嚴(yán)重的不良反應(yīng)。

PROGEN的AAV抗體可對(duì)已有AAV免疫反應(yīng)的病人進(jìn)行篩查，AAV ELISA檢測(cè)試劑盒能夠可靠地檢測(cè)出病毒滴度，以確保治療型病毒基因載體的合理用量。

       PROGEN的AAV病毒滴度 ELISA法檢測(cè)試劑盒，提供了一種快速，靈敏且可重現(xiàn)的方法，用于AAVs病毒滴度的檢測(cè)。產(chǎn)品包括1型，2型，3型，5型，6型,8型，9型和10型AAV檢測(cè)試劑盒。試劑盒基于夾心ELISA技術(shù)，使用特異性的單克隆抗體特異性地捕獲組裝在AAV衣殼上的特異性蛋白，而未組裝的衣殼蛋白上則不具有該特異性抗體檢測(cè)的蛋白表位，不能被抗體捕獲，從而大大降低了檢測(cè)的假陽(yáng)性率的產(chǎn)生。試劑盒中含有預(yù)包被抗體的96孔微孔板，鏈霉親和素標(biāo)記的抗體，標(biāo)準(zhǔn)品，底物和終止液等，使用方便。

上海起發(fā)熱銷(xiāo)產(chǎn)品progen PRAAV8?。?/strong>

AAV8滴定ELISA

*的微量滴定板酶免疫測(cè)定，用于定量完整的AAV8 wt病毒粒子，AAV8重組病毒體或人腺相關(guān)病毒8的組裝和完整的空衣殼。捕獲抗體檢測(cè)未組裝的衣殼蛋白上不存在的構(gòu)象表位。

貨號(hào)： PRAAV8 
數(shù)量：  96個(gè)測(cè)試

• 產(chǎn)品描述

背景:

*的微量滴定板酶免疫測(cè)定，用于定量完整的AAV8 wt病毒粒子，AAV8重組病毒體或人腺相關(guān)病毒8的組裝和完整的空衣殼。捕獲抗體檢測(cè)未組裝的衣殼蛋白上不存在的構(gòu)象表位。

背景技術(shù)：

腺相關(guān)病毒(aav)是一種小型、無(wú)包膜病毒，其包裝了線性單鏈dna基因組。aav屬于細(xì)小病毒科(parvoviridae)和依賴(lài)病毒屬(dependovirus)，因?yàn)閍av的生產(chǎn)性感染僅在輔助病毒(例如，腺病毒或皰疹病毒)存在的情況下發(fā)生。即使在輔助病毒不存在的情況下，aav病毒(血清型2)也可以通過(guò)整合入宿主人基因組的19q13.4號(hào)染色體來(lái)實(shí)現(xiàn)潛伏。所述aav病毒是已知的能夠位點(diǎn)特異性整合的哺乳動(dòng)物dna病毒(daya和berns,clinicalmicrobiologyreviews,第583–593頁(yè)(2008))。

為了讓aav在臨床上安全使用，已將aav在其基因組的幾個(gè)位置進(jìn)行了遺傳修飾。例如，在許多病毒載體中，rep基因(其是病毒復(fù)制所需的)和位點(diǎn)特異性整合所需的元件已經(jīng)從aav基因組中消除。這種重組aav(raav)以染色體外狀態(tài)存在，并且整合到基因組dna中的效率非常低。因此，raav在宿主細(xì)胞中誘導(dǎo)隨機(jī)誘變的可能性即使沒(méi)有*消除也有所降低。由于這些特性和缺乏致病性，raav作為基因療法載體在臨床前和臨床應(yīng)用的多個(gè)方面顯示出巨大的前景。新的血清型和自身互補(bǔ)載體正處于臨床測(cè)試中。除了這些正在進(jìn)行的載體開(kāi)發(fā)以外，持續(xù)的努力還集中在可擴(kuò)展的制造工藝上，所述工藝可以高效地產(chǎn)生高滴度的具有高純度和高效力的raav載體。

盡管對(duì)設(shè)計(jì)高效、大規(guī)模的方法來(lái)純化適合人施用的aav產(chǎn)物作出的努力已經(jīng)很大，但是仍然需要更好的aav純化方法。在aav的純化過(guò)程中，宿主細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)中的各種其它蛋白質(zhì)和物質(zhì)可以被更高效地去除。因此，需要包括從最終aav產(chǎn)物中除去宿主細(xì)胞物質(zhì)的步驟的aav純化方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

細(xì)胞培養(yǎng)中aav載體產(chǎn)生的特征是形成復(fù)雜的基質(zhì)，所述基質(zhì)包含來(lái)自破裂細(xì)胞的物質(zhì)。具體而言，宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)、蛋白酶體、細(xì)胞碎片和潛在的病毒特異性受體通常存在于來(lái)自破裂細(xì)胞的物質(zhì)中。所公開(kāi)的方法包括以下步驟：在于生理學(xué)適用的ph下導(dǎo)致更高純度的條件下，從最終aav產(chǎn)物中去除宿主細(xì)胞材料。

一方面，提供了純化腺相關(guān)病毒(aav)的方法，所述方法包括：

(a)在允許含有aav的溶液中的aav與親和樹(shù)脂之間結(jié)合的條件下，將所述溶液裝載到針對(duì)aav的親和樹(shù)脂上；

(b)進(jìn)行至少兩個(gè)洗滌步驟；以及

(c)從親和樹(shù)脂上洗脫aav。

在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括使含有aav的溶液與陰離子交換劑接觸，并在將含有aav的溶液裝載到親和樹(shù)脂上之前，從陰離子交換劑中洗脫含有aav的溶液。

在一些實(shí)施方案中，洗滌步驟中的至少一個(gè)步驟包括將包含有機(jī)溶劑或去垢劑的緩沖液施加到親和樹(shù)脂。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含trishcl和鹽。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含z氨酸、z氨酸-hcl、J氨酸-hcl、賴(lài)氨酸-hcl、?；撬帷es-na、bis-tris和n-乙?；?d,l-se氨酸中的一種或多種。在一些實(shí)施方案中，鹽是nacl。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含乙酸鈉。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含氯化鎂。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含trishcl和乙二醇。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含蔗糖和甘油之一以及J氨酸-hcl。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含?；撬岷鸵叶?。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含J氨酸-hcl、賴(lài)氨酸-hcl和z氨酸-hcl。在一些實(shí)施方案中，緩沖液包含trishcl和dmso。

 Name.          Product No.     Quantity
AAV1 Titration ELISA PRAAV1 96 tests

AAV2 Titration ELISA PRATV 96 tests
AAV2 Titration ELISA 2.0R PRAAV2R 96 tests
AAV3 Titration ELISA 2.0R PRAAV3R 96 tests

AAV5 Titration ELISA PRAAV5 96 tests
AAV6 Titration ELISA PRAAV6 96 tests
AAV8 Titration ELISA PRAAV8 96 tests
AAVrh10 Titration ELISA  PRAAV10 96 tests