nanohelix DirectFast qRT-PCR 試劑盒說明書

DirectFast qRT-PCR 試劑盒

RealHelix™ DirectFast qRT-PCR Kit是一種基于探針的 qRT-PCR 試劑盒，設(shè)計(jì)用于從動(dòng)物組織和各種臨床樣本（包括全血、血清和拭子收集）中直接實(shí)時(shí)擴(kuò)增 RNA，無需任何 RNA 純化過程。快速反應(yīng)可以在一小時(shí)內(nèi)完成qRT-PCR循環(huán)。該酶混合物是逆轉(zhuǎn)錄酶、抗體抑制的Taq DNA 聚合酶、RNase 抑制劑和不耐熱的尿嘧啶-DNA-糖基化酶 (HL-UDG)的優(yōu)化混合物。反應(yīng)緩沖液包含所有必需的成分，包括優(yōu)化的緩沖液成分、Mg 2+、dUTP 和dNTP. 應(yīng)用的 HL-UDG/dUTP 系統(tǒng)消除了先前反應(yīng)中 PCR 產(chǎn)物的殘留污染。HL-UDG 在 PCR 混合物的設(shè)置和處理過程中有效地去除含有 dU 的 DNA 中的尿嘧啶殘基。

圖 1. 使用 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 試劑盒   的直接和多重實(shí)時(shí) RT-PCR 。

按照該方案制備摻有 10 8個(gè) SARS-CoV-2 RNA 拷貝的拭子裂解液。使用三組不同的目標(biāo)特異性引物和_ _ _探針（S基因、ORF8和N基因）。探針用FAM( S基因)、HEX( ORF8 )和德克薩斯紅( N基因)標(biāo)記。使用 RealHelix TM DirectFast測(cè)試多重反應(yīng) 實(shí)時(shí) PCR 儀器 Bio-Rad CFX96 上的 qRT-PCR 試劑盒。

圖 2. 使用 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR Kit 從小鼠組織中進(jìn)行直接和快速實(shí)時(shí) RT-PCR 。

按照方案制備小鼠全血或肝臟的裂解物。使用小鼠 GAPDH 基因特異性引物和 FAM 標(biāo)記的探針在實(shí)時(shí) PCR 儀器 CFX96 TM (Bio-拉德）。

應(yīng)用  

• 直接定量實(shí)時(shí) RT-PCR

質(zhì)量控制

RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 試劑盒 使用實(shí)時(shí) PCR、靶特異性引物和水解探針根據(jù)提供的方案使用全血或血清進(jìn)行評(píng)估。