注意：使用這些建議作為指導(dǎo)來確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳包被條件。

1. 從瓶子中取出所需數(shù)量的膠原蛋白并分配到稀釋容器中。

2. 將 PureCol ^® 在水中稀釋至 ~50 至 100 µg/ml (~1:30)。也可以使用 0.01 N HCl 溶液。

3. 輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物，直到材料*混合。

4. 將適量稀釋的 PureCol ^® 材料添加到培養(yǎng)表面，確保整個(gè)表面都被包被。

5. 在室溫下孵育，蓋上蓋子 1-2 小時(shí)。吸出任何剩余的材料。或者，在室溫下孵育直至表面干燥。

6. 用無菌培養(yǎng)基或 PBS 仔細(xì)沖洗涂層表面，避免刮傷表面。

7. 涂層表面已準(zhǔn)備好使用。如果保持無菌狀態(tài)，它們也可以在 2-10°C 潮濕或風(fēng)干的條件下儲(chǔ)存。

3-D 凝膠制備程序

1. 將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中，輕輕旋轉(zhuǎn)。

2. 使用無菌 0.1 M NaOH 將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0–7.5。仔細(xì)監(jiān)測(cè) pH 調(diào)節(jié)（pH 計(jì)、酚紅或 pH 試紙）。

3. 用無菌水將最終體積調(diào)整為總共 10 份。

4. 為防止凝膠化，將混合物的溫度保持在 2–10° C。

5. 要形成凝膠，請(qǐng)加熱至 37°C。讓凝膠形成大約 90 至 120 分鐘。