repligen 9333-1蛋白A ELISA試劑盒說明書

MabSelect SuRe™ ELISA Kit Performance Summary

引言

蛋白A ELISA試劑盒（目錄號(hào)9333-1）用于檢測和定量殘留的MabSelect SuRe™ 配體。我們的蛋白A檢測ELISA試劑盒是為那些需要高靈敏度檢測以測量少量污染MabSelect SuRe的客戶開發(fā)的™ 抗體產(chǎn)物中的配體。污染測試發(fā)生在開發(fā)和商業(yè)制造的幾個(gè)不同階段，可能包括：

特定條件下樹脂浸出特性的工藝開發(fā)

制造，通常從純化過程中的幾個(gè)點(diǎn)采集的洗脫樣品

完成產(chǎn)品發(fā)布，以記錄過程控制水平和批次間一致性

以下總結(jié)報(bào)告包含在存在人免疫球蛋白G（hIgG）的情況下，從蛋白A ELISA試劑盒的評(píng)估中收集的性能數(shù)據(jù)。此處提供的數(shù)據(jù)證明了蛋白A ELISA試劑盒：

檢測MabSelect SuRe的能力™ 在PBS-T緩沖液中存在高達(dá)0.5mg/ml hIgG的配體

回收率（準(zhǔn)確度）、批間和批內(nèi)精密度、定量限和檢測限

結(jié)果摘要

MabSelect SuRe公司™ 在hIgG存在下

當(dāng)檢測MabSelect SuRe時(shí)，評(píng)估蛋白A ELISA試劑盒的性能™ 與不含hIgG的標(biāo)準(zhǔn)相比，在hIgG存在下。所有加標(biāo)樣品的最終hIgG濃度為0.125mg/ml（在最終稀釋到測定板中之后）。每個(gè)樣品以8個(gè)重復(fù)制備，并根據(jù)試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行三次單獨(dú)的ELISA。

數(shù)據(jù)處理

將標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合到4參數(shù)擬合分析中。該方程允許反向計(jì)算樣品rPA濃度和LoQ值?；厥章视?jì)算如下：

定量限值（LoQ）

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的LoQ計(jì)算為0.025ng/ml。MabSelect SuRe的LOQ™ 在存在hIgG的情況下，配體加標(biāo)樣品為0.115ng/ml或0.920ng/mg（0.92ppm）。根據(jù)該數(shù)據(jù)設(shè)置檢測MabSelect SuRe時(shí)試劑盒的靈敏度™ 在存在免疫球蛋白的情況下，配體的濃度小于百萬分之一（ppm）。

稀釋線性度

計(jì)算說明

精度（%CV）

通過確定rPA加標(biāo)樣品數(shù)據(jù)點(diǎn)之間的標(biāo)準(zhǔn)偏差并除以平均值來計(jì)算精度。根據(jù)“工業(yè)指南：生物分析方法驗(yàn)證"文本，精度應(yīng)在15%以內(nèi)。

分析內(nèi)精密度

通過平均所有測定的%CV值，計(jì)算每個(gè)rPA加標(biāo)樣品濃度的測定內(nèi)精密度。

分析間精密度

通過測定三次測定的計(jì)算結(jié)果之間的標(biāo)準(zhǔn)差，然后除以平均值，計(jì)算每個(gè)濃度點(diǎn)的測定間精密度。

定量限（LoQ）

定量限（LoQ）定義為0 ng/ml樣品標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。將0 ng/ml OD值的標(biāo)準(zhǔn)偏差乘以10，然后加到基礎(chǔ)0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoQ。對于每個(gè)試劑盒，在存在hIgG的情況下，rPA加標(biāo)樣品的LoQ報(bào)告為每毫升緩沖液中的ng蛋白A（ng/ml）和每毫克hIgG中的ng蛋白質(zhì)A（ppm）。

檢測限（LoD）

檢測限（LoD）定義為0 ng/ml蛋白A標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍

樣品將0 ng/ml OD值的標(biāo)準(zhǔn)偏差乘以3，然后加到基礎(chǔ)0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoD。對于每個(gè)試劑盒，LoD報(bào)告為每毫升（ng/ml）緩沖液中的ng蛋白a和百萬分之一（ppm）。

精確

準(zhǔn)確度描述為與理論加標(biāo)濃度相比，通過測定確定的回收率%。

MabSelect ™, MabSelect SuRe公司™ 和SuRe™ 是GE Healthcare的注冊商標(biāo)。