BIOHUB高效轉(zhuǎn)染試劑說明書

上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè)，共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè)，圓夢中國。

產(chǎn)品詳情

基本信息

存儲

本轉(zhuǎn)染試劑在4℃可保存至少2年。

特點

1. 轉(zhuǎn)染效率高，可用于絕大部分細胞的轉(zhuǎn)染。

2. 即可用于貼壁細胞的轉(zhuǎn)染，也可用于懸浮細胞的轉(zhuǎn)染。

3. 培養(yǎng)液中的血清和抗生素不會影響轉(zhuǎn)染的效率。

4. 對細胞的毒性極低。

5. 操作簡單、重復(fù)性好。

6. 本轉(zhuǎn)染試劑非常適合用于腺病毒和慢病毒的包裝。

7. 與進口轉(zhuǎn)染試劑相比，價格相對較低，性價比高。

配置方法

1、細胞鋪板：

轉(zhuǎn)染前18-24小時進行細胞的鋪板，以便在轉(zhuǎn)染時，貼壁細胞的密度大約在80%左右。

注：培養(yǎng)液中的血清和抗生素不影響轉(zhuǎn)染效率。

2 、BIOHUB-DNA復(fù)合物的制備和轉(zhuǎn)染的具體方法：

轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫10分鐘。下面，以轉(zhuǎn)染35 mm培養(yǎng)皿為例，說明轉(zhuǎn)染的具體方法（如果在別的培養(yǎng)器皿中進行轉(zhuǎn)染，各試劑的使用量見表1）：

（1） 在轉(zhuǎn)染前30-60分鐘，將培養(yǎng)液更換成含血清和抗生素的新鮮培養(yǎng)液。

（2） 將1 μg 質(zhì)粒DNA稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM，用移液槍吹吸3-4次。

（3） 將3 μL BIOHUB轉(zhuǎn)染試劑稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM，用移液槍吹吸3-4次。

（4） 將稀釋好的BIOHUB轉(zhuǎn)染試劑一次性全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中，立即用移液槍吹吸3-4次。

注：此混合的順序不能反向進行！

（5） 室溫放置10-15分鐘，以形成BIOHUB-DNA復(fù)合物。

（6） 將上述100 μL BIOHUB-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻滴入到含細胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿，讓BIOHUB-DNA復(fù)合物分散均勻。

（7） 轉(zhuǎn)染后12-18小時，去除含BIOHUB-DNA復(fù)合物的培養(yǎng)液，加入含血清和抗生素的新鮮培養(yǎng)液。

（8） 24-48小時后檢測轉(zhuǎn)染的效率。

注意事項

注：不能使用含血清的培養(yǎng)基（包括Opti-MEM）進行DNA和BIOHUB轉(zhuǎn)染試劑的稀釋！因為BIOHUB-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物的形成過程不能含有血清。

產(chǎn)品背景

本公司開發(fā)的HighMax高效轉(zhuǎn)染試劑，是新一代的DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)，可用于各種真核細胞系的DNA轉(zhuǎn)染，如HEK293、CHO、COS、NIH3T3等。此外，本試劑也可用于懸浮細胞（如淋巴細胞、昆蟲細胞等）的轉(zhuǎn)染。

產(chǎn)品反饋

圖1. BIOHUB轉(zhuǎn)染HEK293的效果（GFP），轉(zhuǎn)染效率大約為60-80%。