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巨噬細(xì)胞去除實驗

更新時間:2013-07-09      點擊次數(shù):10835

 去除巨噬細(xì)胞是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。巨噬細(xì)胞可吞噬clodronate Liposome,在溶酶體的作用下,clodronate可釋放出來,當(dāng)其達(dá)到一定濃度時,可引起巨噬細(xì)胞的凋亡,從而去除巨噬細(xì)胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位臨近的巨噬細(xì)胞,如肺、膝關(guān)節(jié)、腫瘤局部和腦等;也可尾靜脈或腹腔注射去除循環(huán)途徑中的單核巨噬細(xì)胞,如肝臟和脾臟中的巨噬細(xì)胞。

 

1.       脂質(zhì)體的準(zhǔn)備

美國的FormuMax Scientific可以提供多種clodronate Liposome 具體產(chǎn)品可以上http://www.liposomeexpert.com查詢,他們中國代理商是上海起福生物科技有限公司

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2.       脂質(zhì)體的體內(nèi)注射

隔日尾靜脈注射200ul clodronate liposome,根據(jù)實驗要求制定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細(xì)胞的去除效率。

 

尾靜脈注射方法:

1.       將小鼠放在倒扣的飯盒內(nèi),從孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈,2條動脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側(cè)的靜脈;

2.       將紗布浸泡于約70度的溫水中,拿出后包裹尾巴,以達(dá)到使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的;

3.       行尾部靜脈注射時,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行小于30°,從尾巴的下1/4處進(jìn)針,開始注入藥物時應(yīng)緩慢,仔細(xì)觀察,如果無阻力,無白色皮丘出現(xiàn),說明已刺入血管,可正式注入藥物。

有的實驗需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始,按次序向尾根部移動,更換血管位置注射給藥。拔出針頭后,用棉球按住注射部位輕壓1-2min,止血。

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